專利名稱：高產sod云芝菌絲體深層培養方法
技術領域：
本發明涉及一種能提高食用菌菌絲體中SOD活性的方法，具體地說，涉及通過深層培養獲得高產SOD云芝菌絲體的方法。
背景技術：
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，簡稱SOD)是一種能夠清除超氧陰離子的酶，在機體的抗氧化防御體系中占有重要的地位，廣泛存在于動物、植物、所有好氧微生物及少數厭氧微生物體內。SOD可以提高人體對自由基損傷而誘發疾病的抵抗能力及對自由基外界誘發因子的抵抗能力，消除肌體疲勞，增強對超負荷的適應力，具有抗炎、抗衰老和抗輻射作用，已經廣泛應用于醫療、保健、食品及日用化學工業等方面。目前，SOD主要來源于動物血液，但其來源有限。
云芝(Coriolus versicolor)是能夠治療疾病、具有很高藥用價值的一類藥用真菌，在提高人體免疫功能、滋補、抗衰老以及對預防、抑制或治療疾病等方面的作用，早已受到我國歷代醫藥學家的關注，其醫療價值和保健作用也已引起了世界各國的廣泛重視。選擇云芝作為產SOD菌株具有發酵周期短、產量高、SOD活力較高、藥用價值高、產品風味清香等優點，開發前景廣闊。
發明內容
本發明的目的在于針對上述問題，提供一種通過深層培養獲得高產SOD云芝菌絲體的方法。
為達到上述目的，本發明的技術方案如下高產SOD云芝菌絲體深層培養方法，采用云芝菌絲體進行液體發酵培養，培養基組成為馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH；培養條件為接種量10％，菌齡3天，培養溫度為23～25℃，采用微弱光照，發酵周期為4天。
本發明還包括物理方法對培養結束的云芝菌絲體進行應激的步驟。如將培養結束的菌絲體進行30℃熱處理2小時后再進行10℃冷處理1.5小時，或用38kHz超聲波對培養結束的云芝菌絲體處理40分鐘。
本發明選取云芝進行菌絲體的液體發酵培養，通過優化培養工藝，包括培養基成分和含量以及改變菌絲體培養的環境條件、培養方式等提高菌絲中SOD活性。并可通過物理應激方法對云芝菌絲體產SOD進行誘導，使菌絲中SOD活性得到進一步提高。
本發明成本低、后處理工藝簡單，易于實現工業化生產，并可借助本發明開發一種富含SOD的藥用真菌類功能保健食品或藥劑，為新型SOD保健食品或藥劑的開發奠定基礎。
具體實施例方式
下述菌種均為云芝菌株。
對比例采用常用的馬鈴薯綜合培養基馬鈴薯(去皮)200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，維生素B15～10mg，瓊脂20g，水1000mL，24℃、150r/min。
培養條件普通光照，2天菌齡菌種接種，接種量為10％，培養4天后收獲菌絲體。
獲得4.1g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為1.1U/gDW，單位體積發酵液SOD總活力為4.5U/ml。
實施例1培養基馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH。24℃、150r/min。
培養條件普通光照，2天菌齡菌種接種，接種量為10％，培養4天后收獲菌絲體。
獲得12.0g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為4.5U/gDW，單位體積發酵液SOD總活力為54.0U/ml。
實施例2培養基馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH。
培養條件接種量10％，菌齡3天，培養溫度為23～25℃，采用微弱光照，發酵周期4天。
獲得18.0g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為4.3U/gDW，單位體積發酵液SOD總活力為77.4U/ml。
實施例3培養基及培養條件同實例3，當培養結束后，對發酵液進行30℃熱處理2h后再進行10℃冷處理1.5h。
獲得17.6g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為6.6U/gDW，單位體積發酵液SOD總活力為116.2U/ml。
實施例4培養基及培養條件同實例3，培養結束后，用38kHz超聲波處理云芝發酵液40min。
獲得17.9g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為6.3U/gDW，單位體積發酵液SOD總活力為112.8U/ml。
權利要求
1.高產SOD云芝菌絲體深層培養方法，其特征是采用云芝菌絲體進行液體發酵培養，培養基組成為馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH；培養條件為接種量10％，菌齡3天，培養溫度為23～25℃，采用微弱光照，發酵周期為4天。
2.根據權利要求1所述的高產SOD云芝菌絲體深層培養方法，其特征是對培養結束的云芝菌絲體采用物理應激方法進行應激。
3.根據權利要求2所述的高產SOD云芝菌絲體深層培養方法，其特征是所述物理應激方法為將培養結束的菌絲體進行30℃熱處理2小時后再進行10℃冷處理1.5小時。
4.根據權利要求2所述的高產SOD云芝菌絲體深層培養方法，其特征是所述物理應激方法為用38kHz超聲波對培養結束的云芝菌絲體處理40分鐘。
全文摘要
本發明涉及一種能提高食用菌菌絲體中SOD活性的方法，公開了一種通過深層培養獲得高產SOD云芝菌絲體的方法。它采用云芝菌絲體進行液體發酵培養，培養基組成為馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH；培養條件為接種量10％，菌齡3天，培養溫度為23～25℃，采用微弱光照，發酵周期為4天。本發明還包括物理應激步驟。本發明成本低、后處理工藝簡單，易于實現工業化生產，并可借助本發明開發一種富含SOD的藥用真菌類功能保健食品或藥劑，為新型SOD保健食品或藥劑的開發奠定基礎。
文檔編號A01G1/04GK1568652SQ20041002712
公開日2005年1月26日 申請日期2004年5月10日 優先權日2004年5月10日
發明者黃志立 申請人:深圳職業技術學院