專利名稱：提高植物銅吸收的微生物菌劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種高效微生物菌劑及其制備方法，尤其是一種能提高植物銅吸收微生物菌劑及其制備方法。
背景技術：
目前，公知公用的微生物肥料多是由固氮菌、磷細菌、鉀細菌、光合細菌、芽孢桿菌、硅酸鹽細菌等細菌組成，通過改善植物的營養狀況來提高植物的產量和品質。相對于化肥而言，這些產品的應用對于生態環境的保護起了積極的作用，但是這些微生物肥料對于土壤污染尤其是重金屬污染的生物修復往往無能為力。
而近年來出現的叢枝菌根菌劑也多是集中在改善植物的礦質營養、提高抗旱性、促進植物的生長等幾個方面，如中國專利00137712.4號的說明書中公開了一種具有抗旱解磷功能的叢枝菌根菌劑及其生產方法，但還未見有提高植物重金屬抗性方面的專利或產品。
發明內容
本發明的目的在于提供一種可以提高植物銅吸收的微生物菌劑及其制備方法，該微生物菌劑可以有效地提高植物對銅污染的抗性，促進植物的生長，提高對銅的吸收量。
本發明的上述目的是這樣實現的一種可以提高植物銅吸收的微生物菌劑，其是含有多種有益微生物的復合微生物活菌劑，包括蘇格蘭球囊霉(Glomus caledonium)、珠狀巨孢囊霉(Gigaspora margarita)、易誤巨孢囊霉(Gigaspora decipens)、吉爾莫盾巨孢囊霉(Scutellospora gilmori)，其特征在于還包括多種叢枝菌根真菌和耐銅的青霉菌，所述叢枝菌根真菌為無梗囊霉屬(Acaulospora)和球囊霉屬(Glomus)的叢枝菌根真菌，所述耐銅的青霉菌為淡紫青霉(Penicillium lilacinum)和點狀青霉(Penicillium notatum)。
本發明所述的微生物菌劑，其特征在于還包括含有多種礦物質和有機物的培養基，所述培養基為培養叢枝菌根真菌的基質河沙、泥炭和植物根段，以及培養青霉菌的硝酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、氯化鉀、硫酸亞鐵和蔗糖。
本發明還提供了一種提高植物銅吸收的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，具有如下過程A、至少包括一次叢枝菌根真菌菌劑的擴大生產過程，該叢枝菌根真菌菌劑的擴大生產過程具有如下步驟①準備接種物以含有叢枝菌根真菌孢子、菌絲及被侵染宿主植物根段的土樣作為接種物；②準備基質以河沙和泥炭作為基質，并混入尿素和過磷酸鈣；③種植宿主植物在基質中按質量比3％-5％的接種量用層施法或混施法接入上述接種物，然后在基質中加入水，播種宿主植物的種子，常規管理，使宿主植物生長3-4個月；④把宿主植物的地上部剪去，取宿主植物根段以及宿主植物根段的土壤，剪碎宿主植物根段混勻，風干后即得叢枝菌根真菌菌劑；B、至少包括一次青霉菌的擴大生產過程，其是把青霉菌的繁殖體接入液態察氏培養基中，震蕩培養3天，得含有青霉菌的液體培養基；C、把由過程B得到的含有青霉菌的液體培養基拌入由過程A得到的叢枝菌根真菌中混勻，風干后即得提高植物銅吸收的微生物菌劑。
本發明所述的方法，其特征在于，所述宿主植物為三葉草、蘇丹草或玉米。
本發明所述的方法，其特征在于，所述基質是先將河沙和泥炭過1mm篩，然后按體積比1∶1混合均勻制得，混入尿素的量為0.078克/千克基質，混入過磷酸鈣的量為0.33克/千克基質。
本發明所述的方法，其特征在于，所述叢枝菌根真菌菌劑中叢枝菌根真菌的孢子密度大于10個/克基質。
本發明所述的方法，其特征在于，所述震蕩培養的溫度為30℃。
本發明所述的方法，其特征在于，所述青霉菌的孢子數大于109個/毫升。
本發明所述的方法，其特征在于，把含有青霉菌的液體培養基按照100毫升/千克的比例拌入叢枝菌根真菌菌劑中混勻。
下面，結合具體實施例，對本發明作進一步詳細說明。
具體實施例方式
把河沙和泥炭過1mm篩，按照1∶1體積混合，并混入一定量的尿素(0.078克/千克基質)和過磷酸鈣(0.33克/千克基質)，稱重后裝入塑料箱內。以含有蘇格蘭球囊霉(Glomus caledonium)、珠狀巨孢囊霉(Gigasporamargarita)、易誤巨孢囊霉(Gigaspora decipens)、吉爾莫盾巨孢囊霉(Scutellospora gilmori)以及無梗囊霉屬(Acaulospora)和球囊霉屬(Glomus)的多種叢枝菌根真菌的土樣作為接種物，接種量為3％-5％。混施法拌入基質中，澆入20％左右的水，播種蘇丹草。常規管理，3個月后檢查土壤中叢枝菌根的孢子密度是否＞10個/克干土，達到標準后，把蘇丹草地上部分剪去，把根剪碎，與基質混勻，風干待用。
把保存在真菌培養基斜面上的青霉菌繁殖體接入裝有液態察氏培養基的三角瓶(250～500ml)中，30℃震蕩培養3天。檢查培養基中的孢子數(＞109個/毫升)。如果符合要求，把含有青霉菌的液體培養基按照100毫升/千克的比例拌入風干的叢枝菌根真菌菌劑中混勻，風干后在常溫條件下即可保存應用。
將此菌劑與植物種子拌種后播種于銅污染的土壤中，與沒拌菌劑的植株相比，植物的生長狀況明顯改善，生物量和銅含量顯著增加，從而提高了銅污染的植物修復效率。
權利要求
1.提高植物銅吸收的微生物菌劑，其是含有多種有益微生物的復合微生物活菌劑，包括蘇格蘭球囊霉、珠狀巨孢囊霉、易誤巨孢囊霉、吉爾莫盾巨孢囊霉，其特征在于還包括多種叢枝菌根真菌和耐銅的青霉菌，所述叢枝菌根真菌為無梗囊霉屬和球囊霉屬的叢枝菌根真菌，所述耐銅的青霉菌為淡紫青霉和點狀青霉。
2.如權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于還包括含有多種礦物質和有機物的培養基，所述培養基為培養叢枝菌根真菌的基質河沙、泥炭和植物根段，以及培養青霉菌的硝酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、氯化鉀、硫酸亞鐵和蔗糖。
3.一種提高植物銅吸收的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，具有如下過程A、至少包括一次叢枝菌根真菌菌劑的擴大生產過程，該叢枝菌根真菌菌劑的擴大生產過程具有如下步驟①準備接種物以含有叢枝菌根真菌孢子、菌絲及被侵染宿主植物根段的土樣作為接種物；②準備基質以河沙和泥炭作為基質，并混入尿素和過磷酸鈣；③種植宿主植物在基質中按質量比3％-5％的接種量用層施法或混施法接入上述接種物，然后在基質中加入水，播種宿主植物的種子，常規管理，使宿主植物生長3-4個月；④把宿主植物的地上部剪去，取宿主植物根段以及宿主植物根段的土壤，剪碎宿主植物根段混勻，風干后即得叢枝菌根真菌菌劑；B、至少包括一次青霉菌的擴大生產過程，其是把青霉菌的繁殖體接入液態察氏培養基中，30℃震蕩培養3天，得含有青霉菌的液體培養基；C、把含有青霉菌的液體培養基拌入叢枝菌根真菌菌劑中混勻，風干后即得提高植物銅吸收的微生物菌劑。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述宿主植物為三葉草、蘇丹草或玉米。
5.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述基質是先將河沙和泥炭過1mm篩，然后按體積比1∶1混合均勻制得，混入尿素的量為0.078克/千克基質，混入過磷酸鈣的量為0.33克/千克基質。
6.如權利要求3所述的方法，其特征在于，把含有青霉菌的液體培養基按照100毫升/千克的比例拌入叢枝菌根真菌菌劑中混勻。
全文摘要
本發明公開了一種能有效提高植物銅吸收的微生物菌劑及其制備方法。所選用的菌種含有多種有益微生物，包括蘇格蘭球囊霉、珠狀巨孢囊霉、易誤巨孢囊霉、吉爾莫盾巨孢囊霉以及無梗囊霉屬和球囊霉屬的多種叢枝菌根真菌和淡紫青霉、點狀青霉等耐銅的青霉菌。選用菌根依賴性強、須根發達的三葉草、蘇丹草或玉米為宿主植物，采用河沙和泥炭等作為培養基質，實現了叢枝菌根菌劑的高效生產。把青霉菌的繁殖體接入液態察氏培養基中培養，可實現對青霉菌進行擴大生產。該菌劑能提高植物對土壤銅污染的耐性，并顯著提高植物的生物量和銅吸收量，對提高土壤銅污染的生物修復效率有較好作用。
文檔編號A01N63/04GK1625951SQ20031010656
公開日2005年6月15日 申請日期2003年12月9日 優先權日2003年12月9日
發明者林先貴, 尹睿, 王發園, 吳龍華 申請人:中國科學院南京土壤研究所