專利名稱：一種用于生產鮮切花的百合種球繁育方法
技術領域：
本發明涉及花卉培育方法，具體為一種用于生產鮮切花的百合種球繁育方法。
背景技術：
隨著人們生活水平的提高，人們對鮮切花的數量和質量的要求都在不斷的提高，而百合作為全世界最主要的鮮切花之一更是如此，百合花姿雅致，葉片青翠娟秀，莖干亭亭玉立，是名貴的切花新秀，其色澤鮮艷，是盆栽、切花和點綴庭園的名貴花卉，在園林中，適合布置成專類花園，如巧妙地利用不同種類自然花期之差異及種與品種。目前，我國在百合繁殖栽培方面的脫毒技術和規模化生產技術都比較落后，不能在全國的廣大地區普遍栽培，對進入家庭和高級場所都存在繁殖和栽培技術不過關的問題，每年需從國外進口百合種球8000萬粒以上，進行鮮切花生產不但浪費了大量的外匯，而且常常受到外商的制約。
發明內容
針對上述問題，本發明的目的在于提供一種用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，可以大量生產出無病毒、優質種苗種球，并通過低溫處理打破休眠、調整花期，實現正常開花。
本發明的技術方案是一種用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將從荷蘭引進的1代生產用商品種球放入恒溫22～25℃下，待芽長到1cm～2cm時，移入35～45℃的溫度下處理20～40天，此時芽長約5～6cm左右；2)將莖尖取下進行常規消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.1～0.5mm左右的莖尖分生組織；3)在MS培養基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤(BA)0.1～1.0mg/l、萘乙酸(NAA)0.1～1.0mg/l、蔗糖20～50g/l，再加入1～1000μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑(ribavirin)均勻混合得百合誘導培養基，將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導，35～45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3～5個芽分成一小塊接種于和誘導一樣的培養基上進行擴繁，擴繁周期為30～35天；
5)當擴繁達到一定數量后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養基母液+吲哚丁酸(IBA)0.2～1.0mg/l+蔗糖15～30g/l的生根培養基上進行生根培養，生根培養基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6～6.5g/l，將1/2MS培養基母液和IBA均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養基；將叢生狀小苗繼續接入擴繁的培養基中進行擴繁，生根時間約10～20天左右，大部分苗已長出2～3條0.5～1.5cm長左右的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行3～5天的瓶煉(將培養容器直接拿到室外，在溫度25℃左右放置)后取出，洗凈附著在根部的培養基(即步驟5)中生根培養基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶1.5～3.5的移栽基質中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平(在室外自然條件下降到正常室外濕度)；7)培養成苗后，將成活的百合苗移栽入隔離區，即移栽到網室內進行種球培養(為防止病毒感染，用32目的網保護，空氣和陽光可以進入，網室溫度范圍為20～25℃)，按生產中正常肥水管理，經過兩年后，周徑達到12～20cm，便可成為商品種球。
8)將商品種球置于5～10℃的低溫下處理6～8周時間后，即可移栽到鮮切花生產基地，進行鮮切花生產。
本發明IBA、NAA、BA均為植物激素。
本發明的有益效果是本發明提供了一種新的脫毒技術和一套成熟、完整的切花百合種球規模化生產的方法，通過熱處理、莖尖分生組織培養、化學藥劑處理三種方法相結合，可以使影響切花百合生產的主要四種病毒(百合無癥狀病毒、百合黃瓜花葉病毒、煙草環斑病毒、郁金香碎色病毒)脫毒達到100％；通過低溫處理種球，打破休眠，實現正常開花；通過組織培養的方法，進行無病毒種苗的大量生產，從脫毒種苗生產到大田種球的培育，從種球采收到采后處理，形成了一套完整、成熟的技術和工藝，實現了切花百合種球大規模工廠化生產。
具體實施例方式
實施例1用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將從荷蘭引進的1代生產用商品種球放入恒溫25℃下，待芽長到2cm時，移入45℃的溫度下處理40天，此時芽長約6cm左右；2)將莖尖取下進行常規消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.5mm左右的莖尖分生組織；3)在MS培養基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤(BA)1.0mg/l、萘乙酸(NAA)1.0mg/l、蔗糖50g/l，再加入200μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑(ribavirin)均勻混合得百合誘導培養基，將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導，45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將5個芽分成一小塊接種于和誘導一樣的培養基上進行擴繁，擴繁周期為35天；5)當擴繁達到一定數量后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養基母液+吲哚丁酸(IBA)1.0mg/l+蔗糖30g/l的生根培養基上進行生根培養，生根培養基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6.5g/l，將1/2MS培養基母液和IBA均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養基；將叢生狀小苗繼續接入擴繁的培養基中進行擴繁，生根時間約10天左右，大部分苗已長出3條1.5cm長左右的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行5天的瓶煉(將培養容器直接拿到室外，在溫度25℃左右放置)后取出，洗凈附著在根部的培養基(即步驟5)所述生根培養基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶2的移栽基質中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平(在室外自然條件下降到正常室外濕度)；7)培養成苗后，將成活的百合苗移栽入隔離區，即移栽到網室內進行種球培養(為防止病毒感染，用32目的網保護，空氣和陽光可以進入，網室溫度為20℃，按生產中正常肥水管理，經過兩年后，周徑達到20cm，便可成為商品種球。
8)將商品種球置于-8℃的低溫下處理8周時間后，即可移栽到鮮切花生產基地，進行鮮切花生產。
實施例2與實施例1不同之處是用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫22℃下，待芽長到1cm時，移入40℃的溫度下處理20天，此時芽長約5cm；2)將莖尖取下進行常規消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.1mm的莖尖分生組織；3)在MS培養基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.1mg/l、萘乙酸0.1mg/l、蔗糖20g/l，再加入20μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導培養基，將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導，35天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導培養基上進行擴繁，擴繁周期為30天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養基母液+吲哚丁酸0.2mg/l+蔗糖15g/l的生根培養基上進行生根培養，生根培養基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6g/l，將1/2MS培養基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養基；將叢生狀小苗繼續接入擴繁的培養基中進行擴繁，生根時間約20天，大部分苗已長出2條0.5cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行3天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養基(即步驟5)所述生根培養基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶3的移栽基質中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養成苗后，將成活的百合苗移栽到網室內進行種球培養，網室溫度為24℃，按生產中正常肥水管理，經過兩年后，周徑達到12cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于2℃的低溫下處理6周時間后，即可移栽到鮮切花生產基地，進行鮮切花生產。
實施例3與實施例1不同之處是用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫23℃下，待芽長到1.5cm時，移入35℃的溫度下處理30天，此時芽長約5.5cm；2)將莖尖取下進行常規消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.2mm的莖尖分生組織；3)在MS培養基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.5mg/l、萘乙酸0.5mg/l、蔗糖30g/l，再加入800μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導培養基，將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導，40天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將4個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導培養基上進行擴繁，擴繁周期為32天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養基母液+吲哚丁酸0.5mg/l+蔗糖20g/l的生根培養基上進行生根培養，生根培養基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6.2g/l，將1/2MS培養基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養基；將叢生狀小苗繼續接入擴繁的培養基中進行擴繁，生根時間約15天，大部分苗已長出2條1.0cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行4天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養基(即步驟5)所述生根培養基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶2.5的移栽基質中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養成苗后，將成活的百合苗移栽到網室內進行種球培養，網室溫度為21℃，按生產中正常肥水管理，經過兩年后，周徑達到15cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于-1℃的低溫下處理7周時間后，即可移栽到鮮切花生產基地，進行鮮切花生產。
實施例4與實施例1不同之處是用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，其特征在于具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫24℃下，待芽長到2cm時，移入40℃的溫度下處理25天，此時芽長約6cm；2)將莖尖取下進行常規消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.3mm的莖尖分生組織；3)在MS培養基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.8mg/l、萘乙酸0.6mg/l、蔗糖40g/l，再加入500μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導培養基，將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導，40天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導培養基上進行擴繁，擴繁周期為30天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養基母液+吲哚丁酸0.6mg/l+蔗糖25g/l的生根培養基上進行生根培養，生根培養基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6g/l，將1/2MS培養基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養基；將叢生狀小苗繼續接入擴繁的培養基中進行擴繁，生根時間約18天，大部分苗已長出3條1.0cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行5天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養基(即步驟5)所述生根培養基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶1.5的移栽基質中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；
7)培養成苗后，將成活的百合苗移栽到網室內進行種球培養，網室溫度為22℃，按生產中正常肥水管理，經過兩年后，周徑達到18cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于-5℃的低溫下處理6周時間后，即可移栽到鮮切花生產基地，進行鮮切花生產。
實施例5與實施例1不同之處是用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫25℃下，待芽長到2cm時，移入36℃的溫度下處理20天，此時芽長約6cm；2)將莖尖取下進行常規消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.5mm的莖尖分生組織；3)在MS培養基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.3mg/l、萘乙酸0.5mg/l、蔗糖30g/l，再加入5μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導培養基，將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導，45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將5個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導培養基上進行擴繁，擴繁周期為35天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養基母液+吲哚丁酸0.6mg/l+蔗糖15g/l的生根培養基上進行生根培養，生根培養基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6g/l，將1/2MS培養基母液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養基；將叢生狀小苗繼續接入擴繁的培養基中進行擴繁，生根時間約16天，大部分苗已長出3條0.5cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行5天的瓶煉后取出，洗凈附著在根部的培養基(即步驟5)所述生根培養基)，栽入珍珠巖和草炭土為1∶3.5的移栽基質中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養成苗后，將成活的百合苗移栽到網室內進行種球培養，網室溫度為25℃，按生產中正常肥水管理，經過兩年后，周徑達到20cm，便可成為商品種球；8)將商品種球置于1℃的低溫下處理8周時間后，即可移栽到鮮切花生產基地，進行鮮切花生產。
權利要求
1.一種用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，其特征在于具體步驟如下1)將商品種球放入恒溫22～25℃下，待芽長到1cm～2cm時，移入35～45℃的溫度下處理20～40天，此時芽長約5～6cm；2)將莖尖取下進行常規消毒后，在無菌操作臺上利用雙目解剖鏡取大小為0.1～0.5mm的莖尖分生組織；3)在MS培養基母液中加入6-芐胺基腺嘌呤0.1～1.0mg/l、萘乙酸0.1～1.0mg/l、蔗糖20～50g/l，再加入1～1000μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均勻混合得百合誘導培養基，將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導，35～45天后即可分化大量的叢生芽；4)在無菌操作臺上將3～5個芽分成一小塊接種于和步驟3)一樣的誘導培養基上進行擴繁，擴繁周期為30～35天；5)擴繁后，將大苗分離出來，接種于1/2MS培養基母液+吲哚丁酸0.2～1.0mg/l+蔗糖15～30g/l的生根培養基上進行生根培養，生根培養基的制備過程是在水浴鍋中將凝固劑瓊脂溶化，瓊脂加入量為6～6.5g/l，將1/2MS培養基液和吲哚丁酸均勻混合后，加入到溶化的瓊脂中，均勻攪拌，再加入蔗糖均勻攪拌得到生根培養基；將叢生狀小苗繼續接入擴繁的培養基中進行擴繁，生根時間約10～20天，大部分苗已長出2～3條0.5～1.5cm長的根時開始移栽；6)移栽前，首先將生根苗進行3～5天的瓶煉后取出，洗凈附著在步驟5)所述生根培養基，栽入珍珠巖和草炭土為1∶1.5～3.5的移栽基質中，保持空氣濕度在95％以上，并逐漸降低至正常水平；7)培養成苗后，將成活的百合苗移栽到網室內進行種球培養，網室溫度范圍為20～25℃，按生產中正常肥水管理，周徑達到12～20cm后，便可成為商品種球；8)將商品種球置于5～10℃的低溫下處理6～8周時間后，即可進行鮮切花生產。
2.按照權利要求1所述的用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，其特征在于步驟7)所述網室的網孔目數為32目。
全文摘要
本發明公開一種用于生產鮮切花的百合種球繁育方法，具體步驟如下1)將商品種球移入35～45℃的溫度下處理20～40天；2)取莖尖分生組織；3)將莖尖分生組織接種于百合誘導培養基進行誘導35～45天后，分化大量的叢生芽；4)將叢生芽接種于百合誘導培養基上進行擴繁；5)進行生根培養；6)將生根苗進行瓶煉后取出，洗凈附著于根部的培養基，栽入移栽基質中；7)將成活的百合苗移栽到網室內進行種球培養成為商品種球；8)將商品種球置于低溫下處理，即可進行鮮切花生產。本發明通過組織培養的方法，進行無病毒種苗的大量生產，從脫毒種苗生產到大田種球的培育，從種球采收到采后處理，實現了切花百合種球大規模工廠化生產。
文檔編號A01H4/00GK1602676SQ0313503
公開日2005年4月6日 申請日期2003年9月29日 優先權日2003年9月29日
發明者潘利軍, 張明瀚, 王際軒, 赫英勇, 候春萍, 魏永祥 申請人:潘利軍