專利名稱：柳桉組培育苗方法
技術領域：
柳桉組培育苗方法涉及植物組織培養，具體是一種桉樹的組培育苗方法。
背景技術：
柳桉(Eucalyptus saligna)為姚金娘科桉屬植物，是一種速生、材質優良的造林樹種。由于柳桉是異花授粉樹種，用種子繁殖，個體分化大，難以保持柳桉個體的優良種性；同時，種子苗不耐寒，-4℃時絕大多數凍死；而采用常規的扦插繁殖成活率較低，苗木生產成本高，在生產中沒有應用價值。采用組培方法是探索柳桉快速無性繁殖的主要途徑，國內外對柳桉的組培研究也做了一些工作，但是由于一些技術問題沒有突破，因此不能投入規模生產；已研究成功的鄧恩桉與耐寒赤桉的組培方法也尚未能解決柳桉的組培技術問題，因此需要探索柳桉規模化苗木生產的組培方法。
發明內容
本發明旨在研究一種柳桉組培育苗方法，提高柳桉試管苗的增殖系數、生根率及移栽成活率，并結合其它相關的技術措施，使柳桉苗木的規模生產得以實現。
實現上述發明目的的技術方案是柳桉組培方法包括外植體消毒、初培養、繼代培養、生根培養與試管苗移栽幾部分，經HgCl2消毒后的外植體，用CaCl2在無菌條件下清洗，在MS+BA+IBA培養基上進行初培養，試管苗移栽到黃心土加糠殼灰的混合基質中培育，繼代培養與擴大繁殖的培養基為MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內加人工輔助光1500±200Lux；生根培養基為MS+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux；經在生根培養基中培養兩周左右，移至大棚練苗，又經兩周左右再移至混合基質中培育。
下面進一步詳述本發明。
柳桉組培的材料要選擇柳桉優良單株的腋芽作外植體，外植體用清水沖洗30分鐘后，用0.25％HgCl2消毒15分鐘，然后在無菌條件下用0.25～1％的CaCl2清洗3次，以置換出殘留在外植體上的汞離子，再用無菌水清洗3次。經過消毒的外植體，在無菌條件下，接種到MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l的培養基上，在1000±200Lux光照條件下初培養，培養一個月左右，腋芽生長至1～2cm時，進入繼代培養與擴繁；繼代培養與擴繁采用的培養基為MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內加人工輔助光源1500±200Lux，在這樣的培養條件下，試管苗20天的增殖系數達3～4，為柳桉苗木的規模生產打下了基礎；待擴繁的試管苗增殖到一定數量后，選取有一定高度的試管苗進行生根培養，生根培養基為MS+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux，在這種培養條件下，生根率可達95％以上；繼代培養與生根培養使用部分自然散射光，既可節省能源，又可使試管苗在接近自然環境條件下生長，提高移栽成活率。在用于耐寒赤桉的繼代培養基與生根培養基的基礎上加入了NAA，才使柳桉的繼代培養和生根培養的培養條件得到滿足，使柳桉的規模化生產最終實現。在試管苗培養階段，培養溫度為25±3℃，培養基PH為5.8～6.0，光照時間為14小時。試管苗在生根培養基中培養一周左右，開始生根，兩周左右即可移至大棚練苗；練苗是試管苗移栽前的過渡，幫助試管苗逐步適應自然環境，使苗木老健，葉色變深，從而提高試管苗移栽成活率達85％以上。經練苗2周左右后，試管苗移栽到黃心土加糠殼灰的混合基質中培育，黃心土取自耕作層以下的熟化土壤，黃心土與糠殼灰的體積比為2∶1，混合基質不僅透氣、透水性好，而且有苗木生長必需的P、K及其他營養元素，還可減少有害微生物的侵襲。試管苗移栽至混合基質上后要用清水澆透，且每隔3天噴藥一次，以防止病蟲害發生，噴施藥為青霉素、敵克松、多菌靈三種輪流使用。試管苗移栽場地以水泥地面為佳，并且蓋有塑料大棚，晴天防曬，冬天保溫。試管苗移栽時的溫度應控制在0～30℃之間，過高過低都不利于試管苗的成活；在溫度適宜條件下，試管苗移栽20天后開始生長，以后的管理與一般苗木相同。待苗長至8cm時，還可進行組培苗的扦插擴繁，即剪取5cm左右的半木質化的插穗，用100mg/lIBA浸30分鐘，用常規方法扦插于上述混合基質或純黃心土中即可。
用本發明的組培方法培育柳桉試管苗，20天增殖系數達到3～4，生根率達95％以上，移栽成活率達85％以上，柳桉苗木的規模化生產問題得到了根本解決；同時組培苗的扦插擴繁既可擴大苗木生產能力，又可降低苗木成本，為大面積推廣種植柳桉解決了苗木的最大的需求。
具體實施例方式下面為本發明柳桉組培育苗的最佳實施方式。
選取柳桉優良單株的腋芽在經清水沖洗、0.25％HgCl2消毒后，用1％CaCl2在無菌條件下清洗3次，再用無菌水清洗，外植體的初培養基為MS+BA0.2mg/l+IBA1.0mg/l，光照強度為1000Lux，繼代培養基為MS+BA0.2mg/l+IBA0.8mg/l+NAA0.2mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內加人工輔助光1500Lux，生根培養的培養基為MS+IBA0.8mg/l+NAA0.2mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux，試管苗在生根培養基上培養約2周，移入大棚練苗，再經2周左右移至黃心土∶老糠灰＝2∶1(體積比)的混合基質上培養，在溫度適宜條件下，移栽后20天即可生長。
權利要求
1.-種柳桉組培育苗方法，包括外植體消毒、初培養、繼代培養、生根培養與試管苗移栽，經HgCl2消毒后的外植體，用CaCl2在無菌條件下清洗，在MS+BA+IBA培養基上進行初培養，試管苗移栽到黃心土加糠殼灰的混合基質中培育，其特征在于(1)繼代培養與擴大繁殖的培養基為MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內加人工輔助光1500±200Lux；(2)生根培養基為MS+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux；(3)經在生根培養基中培養兩周左右，移至大棚練苗，又經兩周左右再移至混合基質中培育。
全文摘要
柳桉組培育苗方法屬于植物組織培養方法。本發明選擇柳桉優良單株為材料，選取其腋芽做外植體，用CaCl
文檔編號A01H4/00GK1430881SQ0311806
公開日2003年7月23日 申請日期2003年1月29日 優先權日2003年1月29日
發明者彭信海, 譚柏韜, 蔣利媛, 夏曉敏, 羅先權, 陳靈, 劉先芳, 饒紅欣 申請人:湖南省森林植物園, 郴州市林業科學研究所